《表2 细菌素Paracin1.7纯化表》

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《诱导Paracin1.7生成的刺激因子的分离与纯化》


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将10倍浓缩的B.subtilis无细胞发酵上清液进行60%硫酸铵沉淀、CM Sepharose Fast Flow离子交换层析以及Superdex 75凝胶层析三步分离纯化。测定及计算3个步骤的抑菌活力、蛋白质含量、比活力、纯化倍数和细菌素的得率(表2)。粗提液经60%饱和硫酸铵沉淀,测定蛋白质含量,计算其比活力、纯化倍数及回收率,结果表明比活为153.37 AU/mg,纯化倍数为9.71,得率为78.76%,说明在沉淀的过程中刺激因子存在一定损失,经过CM Sepharose Fast Flow离子交换层析后,所得样品比活力为1240.73 AU/mg,被纯化了78.53倍,得率为35.41%,再经过Superdex 75凝胶层析,样品比活力为6641.23 AU/mg,纯化了420.33倍,得率为13.70%。由于在发酵上清液中所含总蛋白含量过少,因此,为了达到后续试验测定的量,需将此过程重复10~15次后,进行后续试验。