《表2 抗体信息表：梅花鹿激活素A重组蛋白真核表达、纯化及其生物活性的测定》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《梅花鹿激活素A重组蛋白真核表达、纯化及其生物活性的测定》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

在猪卵丘颗粒细胞生长密度达到80%左右时，将培养基更换为低血清培养基（含有0.5%胎牛血清），继续培养细胞24 h。然后在低血清培养基中加入外源性重组的梅花鹿激活素A（25 ng·mL-1）处理细胞2 h。将外源性重组的梅花鹿激活素A(25 ng·mL-1）处理的猪卵丘颗粒细胞以及对照组的猪卵丘颗粒细胞用冷的PBS清洗后，按照M-PER?Mammalian试剂盒说明书提取细胞总蛋白。蛋白上样量为30μg，浓缩胶的电泳电压为90 V，时间30 min，分离胶的电泳电压为120 V，时间为75 min。转膜电压为90 V，时间为80 min。用TBST稀释的5%BSA室温振荡封闭1 h。本研究中使用的一抗信息见表2。最佳稀释比例的一抗在4℃冰箱孵育过夜，TBST洗涤3次，每次10 min，再加入用5%BSA稀释的HRP标记的二抗（表2），37℃孵育1 h，TBST洗涤3次，每次10 min，最后用ECL显影。