《表1 引物序列：布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因克隆测序及表达分析》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因克隆测序及表达分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

根据NCBI网站上的牛CRTC1（登录号：XM＿010816996.2）、CRTC3（登录号：XM＿010816996.2）基因序列，运用Primer Premier 5.0设计引物，引物序列如表1所示。提取黑牛和黄牛背最长肌总RNA，反转录成c DNA，检测OD值处于1.8～2.0后，可进行后续实验。以背最长肌组织c DNA为模板，依次加入2×T5 Super Mix12.5μL、上下游引物（10μmol/L）各0.5μL、c DNA模板1μL，置于离心机中混匀后进行RT-PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳后将得到的目的片段进行胶回收，并采用T载体连接试剂盒将目的片段连接到p MD19-T载体上，转化并筛选阳性菌落，提取目的基因重组克隆质粒后送至上海生工生物有限公司进行测序。