《表2 不同使用次数脂肪酶的荧光强度》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《有机溶剂和混合油脂对脂肪酶活性恢复的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

注：不同的字母表示此列数值差异显著，P<0.05。

大多数蛋白质都具有3种能产生荧光发射光谱的内源性氨基酸，分别是酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸，这3种氨基酸的侧链有生色基团，荧光峰位波长分别在348，303，282 nm附近。一般情况下，这些氨基酸的侧链有疏水性，通常位于脂肪酶内核的疏水区。随着反应进行，脂肪酶表面结构被逐渐破坏，使这些疏水基团暴露出来，可通过荧光光谱检测观察脂肪酶结构的变化。图4显示分别使用0～9次的脂肪酶表面疏水性的荧光光谱图。在284.6 nm附近有吸收峰，由此可以判断，脂肪酶Lipozyme TL IM的内源性氨基酸以苯丙氨酸为主。随着使用次数的增加，荧光的吸光强度逐渐升高，表明随着脂肪酶使用次数的增加，脂肪酶的三级结构受到影响，使苯丙氨酸的暴露面积越来越大。表2显示不同使用次数脂肪酶的最大发射波长和峰值。结合图4和表2可知，使用9次的脂肪酶苯丙氨酸暴露最多，三级结构受到的影响最大。结合脂肪酶的酶活性显示：随着脂肪酶的活性逐渐下降，脂肪酶的荧光强度逐渐增强。可能是因为使用次数增加，导致一些维持空间结构的化学键被破坏，使脂肪酶分子的三级结构破坏，用于催化的空间结构崩溃，脂肪酶荧光强度增加，活性下降[18]。