《表1|RT-qPCR-引物序列》

《表1|RT-qPCR-引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《以电纺丝膜为载体观察桂皮醛对高糖环境下成骨细胞的影响》


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用反转录试剂盒合成cDNA。目的基因骨钙蛋白引物及内参GAPDH由上海生工生物公司合成(表1),采用荧光染料法行实时定量反转录聚合酶链反应,根据SYBR Premix Ex Taq说明选择20μL体系:上游引物0.8μL,下游引物0.8μL,SYBRⅡ10μL,DEPC水6.8μL,RT反应液1.6μL。反应条件:95℃预变性30 s,1个循环;95℃变性5 s,60℃退火30 s,45个循环。绘制荧光信号熔解曲线分析,实时定量反转录聚合酶链反应结果用荧光阈值表示;依据公式(2-??Ct)计算目的基因表达量,假定对照组的基因表达量为1,计算各组基因的相对表达量。