《表2 产高级醇酿酒酵母诱变育种》

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《酿酒酵母高级醇代谢研究进展》

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对亲本菌株进行诱变处理和筛选是改良菌株性状的有效手段之一，其中目的菌株的高通量筛选是诱变育种的关键环节。诱变育种技术在酿酒酵母高级醇代谢调控中的应用已有较多的报道（表2）。秦伟帅利用甲基磺酸乙酯对二倍体葡萄酒酵母菌株S.cerevisiae EC1118进行诱变处理并结合有性重组技术，在含氯乙酸异戊酯的合成基础（Synthetic dropout，SD）培养基上筛选获得一株高级醇生成量较出发菌株降低了14.1%的突变菌株[20]。王国正等利用常温常压等离子体诱变和筛选得到一株高级醇生成量比亲本菌株S.cerevisiae CF4降低了20.0%的突变株[23]。本课题组是较早利用人工诱变育种技术选育低产高级醇酿酒酵母菌株的课题组之一。韩涛对啤酒酵母S.cerevisiae SC-2进行紫外线诱变处理，以亮氨酸营养缺陷型为筛选标记，通过制霉菌素法淘汰野生型菌株，最终获得一株高级醇生成量降低25.5%的亮氨酸营养缺陷型菌株[24]。王鹏银等通过低能氮离子注入诱变和制霉菌素法淘汰野生型，获得一株具有亮氨酸营养缺陷特性的突变株。与亲本菌株S.cerevisiae AY-15相比，该突变株的高级醇生成总量降低33.6%，异戊醇生成量降低39.9%[25]。郑玲艳等以清酒酵母S.cerevisiae JS-10为出发菌株，利用紫外线诱变技术结合重氮染色平板筛选，选育出一株高级醇生成量下降32.7%的酵母菌株[26]。在饮料酒酿造过程中，由于生产原料营养丰富，普遍存在高级醇生成量过高的现象，但也存在因酵母菌种、发酵条件等原因造成高级醇生成量不足的问题。为改善单一酵母菌种导致黄酒风味物质含量不足的问题，Yang等利用乙醇定向驯化、紫外线诱变处理筛选克霉唑抗性突变株以及原生质体融合等方法，获得一株乙醇耐受性显著增强同时高级醇合成水平提高13.4%–24.91%的黄酒酵母S.cerevisiae F23[27]。Tian等为提高高酸性条件下青梅果酒酵母S.cerevisiae ET008的高级醇合成水平，利用常温常压等离子体对出发菌株进行诱变，以生长速度为筛选标记，96孔板培养法进行初筛；对初筛获得的120株突变株，以风味物质含量为筛选标记，6孔板培养法进行复筛；对5株风味物质生成量最高的突变株进行实验室适应性驯化，驯化70代后，最终获得一株耐酸能力强、高级醇合成量提高38.2%的突变株[28]。