《表1 猪链球菌7个管家基因检测引物及其产物大小》

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《一株人血源猪链球菌的分子分型与耐药检测》


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根据MLST数据库(https://pubmlst.org/ssuis/)和文献报道[7,8],对猪链球菌7个管家基因(aro A,dpr,cpn60,gki,mut S,rec A,thr A)进行扩增,引物序列见表1。反应体系为:21μL Invitrogen Platinum PCR Super Mix,上下游引物各1μL,DNA模板2μL,共25μL。反应条件为预变性95℃4 min,变性95℃30 s,退火30 s,退火温度参见表1,延伸72℃30 s,30个循环,后续延伸72℃7 min。PCR产物经毛细管电泳仪电泳分析后,送生工生物工程(上海)股份有限公司测序。双向测序后经过组装分析确认的序列,在线递交到猪链球菌MLST网络服务器(https://pubmlst.org/ssuis/)进行分析。