《表1 目标物种的引物信息》

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《多重实时聚合酶链式反应熔解曲线法同步鉴别蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭》

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在NCBI网站获取6种金枪鱼、8种鳕鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭、刺鳞蛇鲭等26种鱼类线粒体DNA序列，利用Mega 7.1软件进行序列比对，选择序列差异大的区域利用软件Oligo 7.56设计特异性引物。设计的引物在NCBI网站通过BLAST程序进行扩增产物同源性及特异性比对，比较不同引物对扩增产物Tm值并选取扩增产物Tm值差异显著的引物用于实验。最终，蓝鳍金枪鱼的特异性引物设计在线粒体DNA的D-loop区，裸盖鱼的特异性引物设计在线粒体DNA的16S r RNA基因，异鳞蛇鲭的特异性引物设计在线粒体DNA的ND4L基因，所有引物由赛默飞世尔科技中国合成（表1）。