《表3 引物特异性验证结果》

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《多重实时聚合酶链式反应熔解曲线法同步鉴别蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭》

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注：表中数据为阳性样品Ct值；-.阴性样品。

多重real-time PCR方法检测物种源性成分的能力与其反应重数密切相关。real-time PCR反应重数越多，各引物对的相互竞争就越激烈，real-time PCR体系的检测能力越容易受到限制。目前，已报道的研究中real-time PCR重数在5重及以下，因此，研究者为了利用尽量少的引物对同步检测尽可能多的物种源性成分，往往将特异性引物设计在属特异种保守的序列处，从而提高所开发方法的检测灵敏度和通量，本实验设计的异鳞蛇鲭引物采用此策略，使其能检测异鳞蛇鲭和刺鳞蛇鲭。引物特异性验证的结果见表3。