《表1 RT-PCR引物序列》

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《补肾活血汤含药血清对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响》


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以5×104个/m L的单细胞悬液接种入12孔板,细胞贴壁后按分组更换含药血清,每隔2 d换液1次,培养21 d。TRIzol法提取细胞总RNA,用逆转录试剂盒(Prime Script?RT Master Mix)将RNA反转录为c DNA,用SYBR Green Premix Ex TaqⅡ进行检测,在Quant StudioTMReal-Time PCR系统中根据试剂说明书设定反应参数(95℃5 min;循环:95℃15 s,60℃30 s,共35个循环)。成骨分化相关指标引物序列如表1所示。记录CT值,根据2-ΔΔCT法计算各目的基因的相对表达量。