《表1 各基因引物碱基序列》

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《lncRNA ANRIL调控ATM-E2F1信号通路在胆囊癌上皮间质转化中的作用》

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将转染72 h后的细胞用TRIzol(Takara，日本）提取总RNA，采用微量分光光度计（Nano Drop，美国）测定核酸的OD值和OD260/280，用反转录试剂盒（Takara，日本）合成c DNA。ANRIL、ATM、E2F1引物均由上海生物工程有限公司合成（表1）。RT-q PCR使用SYBR Green荧光染料试剂盒，20μL反应体系。以GAPDH为内参，2-ΔΔCt表示实验组与对照组目的基因表达的倍比关系，其中ΔΔCt=ΔCt实验组-ΔCt对照组，ΔCt=Ct目的基因–Ct内参基因，Ct为反应的实时荧光强度达到设定阈值所需的扩增循环数，此时扩增呈对数期增长。实验重复3次。