《表2 各基因引物碱基序列》

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《运动对生长发育期高脂饲养大鼠棕色脂肪组织功能调控相关基因表达的影响》

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使用TAKARA公司SYBR Premix Ex Taq II试剂盒，以及生工基因公司b661201-0001大鼠内部参照基因rps18及m RNA引物对BMP-4、PGC-1α、PPAR-γ和UCP-1基因进行扩增，引物序列见表2。扩增体系为：10μl的SYBR Premix Ex Taq II（Tli RNase Plus）（2×），0.8μl的引物F(10μM），0.8μl的引物R（10μM），2μl的c DNA模板，0.4μl的ROX Reference Dye II(50×），加Rnase-free dd H2O至20μl。PCR反应条件为：95℃预变性30 s，循环扩增95℃5 s→60℃30s-34 s（循环40次），反应结束后确认Real Time PCR的扩增曲线和融解曲线，进行PCR定量时制作标准曲线，利用CT值求得各样本基因表达量等。