《表1 RT-PCR引物碱基序列》

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《梅花鹿茸Ⅰ型胶原对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响》

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将保存的各组大鼠股骨从-80℃冰箱中取出，立即浸入液氮中，在液氮保护下，迅速研磨至细粉。应用Trizol法提取各组大鼠骨组织中的总RNA，并利用琼脂糖电泳检测。取适量RNA按照试剂盒说明进行反转录实验，其余样品加入1 m L无水乙醇，-80℃保存备用。设置程序:1) 45℃，50 min；2) 70℃，10 min。反应结束后，应用超微量紫外分光光度计检测反转录液中c DNA的浓度。设置RT-PCR反应程序:95℃，起始模板预变性。1) 95℃，20 s；2) 65℃，10 s；3) 72℃，30 s，循环40次，终止反应。以β-actin为内参基因，分析各组样品β-Catenin、LRP5m RNA的相对表达量，进行差异比较。引物序列见表1。