《表1 RT-q PCR反应引物序列》

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《转录因子12在卵巢癌中的表达及其与预后的相关性》

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将收集的新鲜冰冻卵巢癌组织及相应的正常卵巢组织进行匀浆后，采用TRIzolR试剂按其操作说明书提取组织的总RNA。采用OneStep RT-q PCR试剂盒进行，反应体系为：将提取的总RNA 4.0μL（100 ng）作为模板，加入2×SYBR Green One-Step Mix 12.5μL，上游和下游引物（浓度为10μmol/L）各0.5μL，50×RT/Taq Mix 0.5μL，用DEPC-H2O将体积补至25.0μL，将反应体系混匀后置于RT-q PCR仪上进行反应。反应条件为：42℃反转录30 min，95℃预变性10 min，95℃变性20 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，按仪器标准操作进行熔解曲线分析。引物序列见表1。实验结果用2-ΔΔCt法[16]进行m RNA相对表达水平分析。