《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《LncRNA MEG3在脓毒症患者血浆中的表达及其临床意义》

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LncRNA MEG3及内参GAPDH的引物序列根据参考文献[7]，由上海生工公司采用Primerbank引物设计软件（http://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/）设计并合成，引物序列见表1。荧光定量PCR反应体系为20μL，包括:SYBR Green PCR Master Mix 10μL，上、下游引物（10μmol/L）各1μL，c DNA 2μL，DEPC水补足至20μL。实时荧光定量PCR反应参数:95℃10 min；95℃15 s，60℃1 min，72℃55 s；共35个循环。使用Step OneTM软件在60℃时采集荧光信号并进行熔解曲线分析，LncRNA MEG3的表达水平以2-ΔΔCt法计算，公式:ΔΔCt=[（实验组Ct目的基因-实验组Ct内参基因）-（对照组Ct目的基因-对照组Ct内参基因）]。每组设3个复孔，实验重复3次。