《表2 Cd LEA3基因分离克隆引物》

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《芸香草CdLEA3基因的克隆及原核表达分析》

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将新鲜的芸香草（Cymbopogon distans）在室温条件下脱水3 h。用OMEGA试剂盒提取总RNA，用全式金反转录试剂盒反转录合成c DNA。Cd LEA3基因中间片段扩增采用本实验室自主设计的简并引物LEA3-ZF和LEA3-ZR。根据分离得到的Cd LEA3的中间片段分别设计两轮特异性3'RACE引物（Cd LEA3-3F1，Cd LEA3-3F2）和5'RACE引物（Cd LEA3-5R1，Cd LEA3-5R2）分别与通用引物（表2）搭配运用巢式PCR进行Cd LEA3基因的分离克隆。所有PCR产物均切胶回收后克隆转化，进行阳性克隆筛选后送上海铂尚生物技术有限公司测序鉴定。