《表1 TRAIL及其受体DR4、DcR1引物序列》

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《TRAIL及其受体在PCOS病人卵巢颗粒细胞表达》


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按Trizol说明书提取总mRNA,紫外线分光光度计检测RNA纯度及完整性,取吸光度(A260/A280)为1.8~2.0的样本,严格按照说明书方法,利用逆转录试剂盒(KaTaRa公司)将RNA逆转录为cDNA,置-80℃保存。TRAIL、DR4、DcR1引物由上海生工生物工程公司合成,见表1。按SYBRⅡ说明书进行TRAIL、DR4、DcR1 mRNA表达的检测。反应条件:95℃预变性30s,40个循环;95℃变性5s,60℃变性30s。采集荧光信号及熔解曲线进行分析,应用软件计算各样本的Ct值,应用2-ΔΔCt法计算mRNA相对表达量。