《表1 荧光定量PCR引物序列》

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《mTOR抑制剂AZD2014对肝癌细胞的增殖抑制作用及其机制研究》

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HCCLM3细胞经不同浓度AZD2014处理96 h后弃去旧培养基，冷PBS洗涤细胞2次，再向各培养孔中加入适量Trizol，轻轻摇动培养板，使细胞裂解液流遍所有细胞表面，反复吹打使其充分裂解成匀浆，加入氯仿，离心后取上清，再加入异丙醇，离心后用75%乙醇洗脱，风干后用灭菌用水溶解，测定RNA浓度后取适量RNA按说明配制反应体系进行逆转录反应，再取适量反应产物按荧光定量PCR试剂盒说明配制反应体系并进行反应（引物序列见表1），根据每个样品不同复孔的CT值计算各组平均CT值及△CT值（△CT=CT，UHRF1-CT，GAPDH），并由此计算出2-ΔΔCT值。