《表1 引物序列:mmLDL通过p38 MAPK通路上调小鼠肠系膜动脉ET受体》

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《mmLDL通过p38 MAPK通路上调小鼠肠系膜动脉ET受体》


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提取肠系膜动脉组织的总mRNA并检测其密度。两步法逆转录合成cDNA。cDNA第1条链的合成采用20μL反应体系,转录程序为:25℃10 min,42℃60 min,65℃15 min。50μL qPCR体系的反应程序为:95℃5 min变性;94℃20 s,55℃20 s,72℃30 s,40个循环。反应结束后采用分离曲线分析法以确定PCR产物的特异性。mRNA定量分析采用PCR循环阈值(CT)比较法,以GAPDH为内参照,计算ETA受体、ETB受体和IL-6的mRNA相对表达量。特异性引物序列见表1。