《表1 引物名称及序列：蝴蝶兰Ph SVP的克隆及其在花发育过程中的表达分析》

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《蝴蝶兰Ph SVP的克隆及其在花发育过程中的表达分析》

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根据多种植物的SVP编码区序列设计兼并引物（表1），以蝴蝶兰根尖或叶片的cDNA为模板，RT-PCR扩增得到蝴蝶兰SVP的保守区片段。PCR反应体系为20μL，包括13.2μL ddH2O；2μL 10×PCR buffer；上、下游引物（10μmol·L-1）各1μL；dNTP（2.5 mmol·L-1）1.6μL；rTaq DNA聚合酶0.2μL；cDNA 1μL。PCR反应条件为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，共30个循环；72℃10 min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳和胶回收后，回收片段与pGEM-T easy载体（Promega，美国）连接并转化DH5α感受态细胞，选取菌液PCR为阳性的克隆，由上海英潍捷基贸易有限公司测序。