《表1 漆酶基因引物序列:漆酶同工酶基因在斑玉蕈生长发育过程中的表达分析》

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《漆酶同工酶基因在斑玉蕈生长发育过程中的表达分析》


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利用Primer 5.0设计荧光定量PCR引物,内参基因是斑玉蕈的18S rRNA基因。斑玉蕈10种漆酶同工酶基因(lcc1–lcc10)和18S rRNA的定量PCR引物见表1,引物序列由上海生工生物工程股份有限公司合成。荧光定量PCR扩增体系20μL,包括0.4μL(10μmol/L)引物,10μL SYBR qPCR Mix(TaKaRa),0.4μL ROX(TaKaRa)和2.0μL cDNA。qRT-PCR扩增条件:95℃5min预变性,30个循环包括95℃5s变性,60℃15s退火和72℃20s延伸。基因的相对表达量根据2-ΔΔct方法进行计算(Livak&Schmittgen 2001)。