《表1 引物表:农杆菌介导转化黑曲霉条件优化及脂肪酶表达》

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《农杆菌介导转化黑曲霉条件优化及脂肪酶表达》


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构建黑曲霉脂肪酶ANL表达载体,分别以组成型启动子甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gpdA)和诱导型启动子糖化酶基因启动子(glaA)来启动脂肪酶基因的表达。首先基于NCBI对于黑曲霉脂肪酶基因进行查找,设计引物P1-P8,以黑曲霉基因组为模板,扩增出包含3段内含子的ANL脂肪酶基因序列,后通过重叠延伸PCR去除ANL中的内含子序列,将4段ANL拼接,可获得除去内含子的ANL基因。构建过程用到的引物见表1。