《表2 农杆菌介导遗传转化获得的转基因植株阳性率及其Wx基因编辑情况》

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《利用CRISPR/Cas9技术创制糯稻新材料》

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利用CTAB法提取转化获得T0代植株叶片基因组DNA，通过载体特异性引物CZT-F/R（表1）对转化植株进行了PCR阳性植株筛选，共获得45株转化阳性株。进一步用引物Wx-F/R对Wx编辑位点进行PCR扩增及测序，结果显示45个阳性株系中共获得19个纯合株系，12个双等位突变株系，5个杂合株系，5个套峰突变和4个未发生编辑株系，突变率达91%。4个测序套峰我们猜测其可能是由嵌合体或者是组培诱变的染色体加倍导致（表2）。图3为部分Wx的突变类型。