《表1 试验所需引物：农杆菌转化法高效构建顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株提高头孢菌素C产量》

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《农杆菌转化法高效构建顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株提高头孢菌素C产量》

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将上下游同源片段与扩增后的表达载体pAg1-H3用一步克隆法相连接，得到pAg1-up-down质粒。将质粒进行Kpn I单酶切回收，与扩增出的pAN7-1中潮霉素抗性表达片段进行一步克隆法连接，构建质粒pAg1-?pks。将质粒转化DH5α感受态，挑选4个单菌落，对hph抗性编码区进行菌落PCR验证。对初步验证成功的质粒进行测序。载体构建流程见图1，所需引物见表1。