《表1 引物序列及PCR产物》

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《天山1号冰川冻土微生物总DNA提取方法的比较和优化》


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以提取的冻土微生物总DNA为模板,分别扩增16s rDNA和26s rDNA片段,分析冻土微生物总DNA的提取质量。扩增体系(20μL):10×Taq PCR Buffer 2μL,dNTPs 2μL,正反向引物(表1)各1μL,Taq DNA聚合酶1μL,冻土微生物总DNA溶液1μL,其余用灭菌双蒸水补齐。PCR反应的阴性对照用无菌双蒸水代替DNA模板。扩增条件:95℃预变性5 min;95℃变性30 s;56℃退火30 s;72℃延伸1 min;30个循环;72℃延伸10 min。反应在PCR仪(TC512型,英国Techne公司)上进行。PCR产物用1.0 g/mL琼脂糖凝胶电泳检测。