《表2 RT-qPCR引物及相关信息》

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《双酚A替代品与双酚A对非洲爪蛙急性毒性及其应激响应的比较》


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根据SYBR Green PCR Kit说明,配制10μL反应体系进行RT-qPCR。PCR程序为:95℃预变性15 min,40个循环扩增(95℃变性10 s、退火20 s、72℃延伸20 s)。每个基因在使用之前都进行了扩增效率的验证,计算公式为E=(10-1/slope-1)×100。扩增效率在90%~110%之间、溶解曲线单一且重合、不存在非特异性扩增的基因时,可用于后续实验。进行基因表达分析时,以rpl8为管家基因对各个基因的表达进行标准化[25]。基因的相对表达量根据公式2-ΔΔCT计算[26]。引物及相关信息如表2所示。