《表1 粗酶液分离纯化结果》

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《人体肠道中产尿酸氧化酶细菌的筛选、鉴定与酶学性质研究》

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分离纯化结果如图4所示，提取部分粗酶液，加入70%饱和（NH4）2SO4过夜盐析后，进行透析超滤，再经过SDS-PAGE电泳得到明显蛋白条带。随后利用Sephadex G-100凝胶过滤层析，在293 nm处检测吸光度变化，并检测吸收峰处的酶活，在25管检测到酶活，表示目的蛋白开始被洗脱下来，32管酶活达到最高，41管检测不到酶活，表明已被完全洗脱，收集此吸收峰内的产物即为纯化后的尿酸氧化酶。对得到的纯化产物进行SDS-PAGE电泳，结果如图5所示，25～32管所收集的样品在35 k Da左右有明显条带，33～40管开始出现杂条带，推测其分子质量约为35 k Da。对纯化后的样品进行酶活检测，酶总活力为51.48 U，详细结果参照表1，酶比活为66 U/mg，纯化倍数达到3.6。