《表1 藜麦麸POD分离纯化结果》

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《藜麦麸过氧化物酶分离纯化及酶学特性研究》


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藜麦麸经过浸提、硫酸铵分级沉淀、透析脱盐后,上样于Hitrap DEAE FF(1 m L)阴离子交换层析柱,结果如图1所示。其中,峰I为穿透峰,充分洗去未结合蛋白后,提高盐离子浓度,分别用含0.1,0.2,1.0 mol/L NaCl的洗脱液进行阶梯式洗脱,共出现6个洗脱峰。分别收集洗脱峰并进行活性测定,结果发现,洗脱峰2和3均可以催化过氧化氢和愈创木酚反应,具有过氧化物酶活性。由于峰2组分酶的比活力很小,以后试验只收集洗脱峰3。收集的活性洗脱峰经超滤管脱盐、浓缩后进行SDS-PAGE电泳检测。由藜麦麸POD分离纯化结果可知(表1),经过纯化,该酶的比活力达到了22 753.09 U/mg,纯化倍数为23.78,回收率为19.36%。