《表1 引物序列：膜荚黄芪查尔酮异构酶基因的克隆及表达分析》

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《膜荚黄芪查尔酮异构酶基因的克隆及表达分析》

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引物序列见表1，根据GenBank（登陆号为KY086287）发表的CHI基因序列的编码区设计一对简并引物AmCHI-ju1和AmCHI-jd1，以合成的cDNA为模板进行PCR反应，退火温度为52℃。根据所测得的AmCHI基因的保守区设计5'-RACE引物AmCHI-gsp1和3'-RACE引物AmCHI-gsp2，按照Clontech公司RACE cDNA说明书进行RACE反应，从膜荚黄芪的cDNA扩增获得RACE序列。根据所测得的CHI基因CDS序列设计CDS引物CHI-Cu1和CHI-Cd1。针对获得的AmCHI序列设计了1对荧光定量PCR引物AmCHI-qF和AmCHI-qR。PCR产物用琼脂糖电泳回收以后，克隆到p MD19-T载体，筛选阳性克隆，测序由上海英俊生物有限公司完成并获得CHI基因序列。