《表1 扩增Lb＿PPR1基因引物序列》

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《枸杞Lb＿PPR1的克隆及其在不同育性品种中的表达分析》

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根据实验室前期完成的‘宁杞1号’花药转录组测序数据，利用注释得到的部分Lb＿PPR1序列信息设计特异性引物（表1），分别以‘宁杞1号’和‘宁杞5号’不同时期花药混合样的cDNA第1链为模板进行ORF全长扩增。扩增体系50μL：灭菌水17μL，KOD OneTM PCR Master Mix（TOYOBO）25μL，c DNA第1链5μL，上游引物1.5μL，下游引物1.5μL。PCR 30个循环（98℃10s，60℃5 s，68℃18 s）。用DNA凝胶回收试剂盒对PCR扩增产物进行纯化回收并与pMD18-T载体连接后转化到大肠杆菌DH5α的感受态细胞中，每个样品随机挑取3个阳性克隆送往上海生工测序，最终确定Lb＿PPR1基因的全长cDNA序列信息。