《表1 sgRNA靶点特异性寡核苷酸模板》

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《利用CRISPR/Cas9敲除大麦靶基因》

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注：黑体代表限制酶位点的黏性末端。示例中PAM靶序列用下划线表示。

1）使用限制性内切酶Bsa1或Esp3I克隆2个互补的寡核苷酸，向位置3或位置4引导受体添加1个合适的前间隔序列。按表1设计寡核苷酸序列（不包括PAM）。