《表5 sgRNA1靶点基因型分析》

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《基于CRISPR/cas9系统高效编辑小鼠Galt基因》

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注：加粗字体代表靶点序列；“-”代表缺失碱基

sgRNA打靶位点DNA的PCR产物测序峰图见图6。3种sgRNA靶点序列均出现套峰，且无原序列，初步表明发生了基因编辑，且编辑效率较高。通过TA克隆可将单条PCR产物连接到载体上，再通过测序分析可获得打靶位点的基因型。本研究sgRNA1、sgRNA2和sgRNA3三条sgRNA打靶位点的基因型分析见表5、6、7。3种sgRNA导向序列均可以介导Cas9蛋白，高效、特异性的切割靶点DNA，进而编辑小鼠Galt基因，效率高达100%，编辑后基因型以缺失突变为主。