《表2 制备sgRNA转录模板的PCR体系》

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《基于CRISPR/Cas9构建小鼠UOX基因敲除模型》

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分别按表2混合以下试剂，进行两次PCR扩增sgRNA模板。反应条件均为98℃预变性5 min；按循环程序（98℃30 s，60℃30 s，72℃30 s）进行35个循环；72℃延伸5 min。反应产物取50μL进行2%琼脂糖凝胶电泳，判断PCR结果。回收DNA。