《表2 试验所需各类引物:杨树Ptann3基因克隆与表达特性分析》

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《杨树Ptann3基因克隆与表达特性分析》


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应用美国ABI7500实时荧光定量PCR检测仪检测Ptann3基因在毛果杨的根、下部茎、上部茎、叶柄、成叶、幼叶各部位的相对表达量,以及胁迫下Ptann3基因在叶片中的相对表达量。Ptann3基因均采用上游引物q Ptann3-F,下游引物q Ptann3-R序列。选用Actin作为内参,内参上游引物ACTIN-F,内参下游引物ACTIN-R(表2)。实时荧光定量PCR检测的反应体系为20μL体系:10μL SYBR Green Master(Rox),引物各1μL,模板1μL,水7μL。每个反应重复3次。应用数据分析软件SPSS19.0版本,采用2-ΔΔCt法对实时荧光定量PCR试验结果进行分析与作图。