《表1 m RNA基因引物序列》

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《有氧运动联合HWTX-Ⅰ调控Ⅱ相解毒酶对阻塞性黄疸致中枢神经系统损伤的影响》


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根据脑组织RNA提取说明书严格执行操作,选取试剂盒SYBR?Premix Ex Taq?Ⅱ,购买于TaKaRa公司,将小鼠脑组织放入冰预冷的玻璃匀浆器中,加入1 mL Trizol裂解液,充分匀浆,使组织细胞裂解,按操作步骤依次加入氯仿、异丙醇提取脑组织总RNA,利用逆转录酶逆转录得到cDNA。然后利用各目的基因序列设计特异性引物(表1),进行荧光定量PCR实验。以GAPDH为内参,反应条件为94℃2 min,94℃30 s,56℃30 s,72℃2 min,反应共进行40个循环,每个待测样本设置3个平行管,根据各反应孔的CT值,计算各组目的基因的相对表达量。表达量=2-ΔΔCt,其中ΔΔCt=[目的基因的Ct值(样本组)-管家基因的Ct值(样本组)]-[目的基因的Ct值(校正组)-管家基因的Ct值(校正组)]。