《表1 GRP78、PERK和GAPDH的m RNA引物序列和产物大小》

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《EGCG降低2型糖尿病大鼠肝细胞凋亡与内质网应激蛋白PERK及GRP78表达的实验研究》

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实时定量PCR(RT-PCR）方法检测。提取总RNA，总RNA纯度鉴定，逆转录，反应条件：37℃孵育50 min，70℃保温10 min，反应得到的c DNA放置-20℃保存。两步法扩增，扩增程序为：95℃10 min，(95℃15 sec，60℃60 sec）×45个循环。Real Time反应体系为：2×Ultra SYBR Mixture 10μL，上、下游引物（10μM）各0.4μL，模板2μL，反应体系为20μL。根据Real Time PCR原始检测结果（表1），按照2-△△ct相对定量计算分析，其中ct为循环数。