《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《牛膝甾酮干预SD乳鼠成骨细胞的增殖与分化》

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消化第4代细胞，以5×104/孔的密度接种于12孔板，细胞分4组：0，1，5，10 mg/L牛膝甾酮组，每组3个复孔，在培养箱中培养24 h；待细胞贴壁后，弃去孔内旧培养基，加入含药或不含药的新鲜成骨诱导培养基；培养24，48 h后弃去培养液，用RNA提取试剂盒提取总RNA，紫外分光光度计测定RNA纯度，每组取1.0μg总RNA，分别加入反转录试剂盒的反应体系，在反转录仪中进行反转录生成c DNA后，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）测定OCN、OPN、OPG、CollagenⅠ的表达，采用2-??Ct法并以GAPDH为内参计算上述指标的相对表达量，引物序列见表1。