《表1 引物：来源于嗜碱芽孢杆菌N16-5甘露聚糖利用基因簇的乙酰酯酶AesA的克隆及性质分析》

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《来源于嗜碱芽孢杆菌N16-5甘露聚糖利用基因簇的乙酰酯酶AesA的克隆及性质分析》

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以Bacillus sp.N16-5中提取的基因组为模板，根据DNA序列信息，设计上下游引物，引物序列如表1所示，通过PCR技术进行目的基因的扩增。将扩增得到的目的基因与载体pET28a（+）通过切胶回收进行纯化后，用限制性内切酶Nde I和Xho I进行双酶切，通过琼脂糖凝胶电泳验证酶切结果，并纯化回收。将回收的双酶切后的目的基因与载体pET28a（+）用T4-DNA连接酶进行连接，并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中，选取阳性克隆，提取p ET28a-aesA重组质粒，通过测序验证是否正确。将测序正确的重组质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞中，挑取阳性克隆进行培养和保藏。