《表1 基因定位及表达分析引物信息》
采用Yoshida营养液培养水稻至3叶1心,使用RNA提取试剂盒(Omega,USA)抽提叶片的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和微量分光光度计(NanoDrop 2000,Thermo)检测RNA的浓度和完整性。RNA经检测合格后,使用反转录试剂盒(HiScript?II Q RT SuperMix,南京诺唯赞)获得cDNA;基因表达检测:c DNA模板稀释5倍后用于荧光定量PCR分析。使用SYBR q PCR Master Mix(Vazyme)作为荧光染料,反应体系为20μL,在荧光定量PCR仪上进行(IQ5,Bio-Rad,USA)。PCR条件如下:95℃下预变性1 min;95℃下变性10 s,60℃下退火和延伸30 s,40个循环。引物设计所用软件为DNAMAN 6.0,引物序列见表1。以肌动蛋白基因OsActin作为内参基因,基因表达的相对量采用2–△△CT法计算。样本间的差异显著性分析采用Student-t检验。
图表编号 | XD00127769000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.10 |
作者 | 潘孝武、黎用朝、刘文强、熊海波、董铮、薛丹、盛新年、赵文锦、魏秀彩、李小湘 |
绘制单位 | 湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部长江中下游籼稻遗传育种重点实验室、湖南省农业科学院水稻研究所、农业部 |
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