《表1 RT-PCR引物序列》

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《亮氨酸和异亮氨酸对脂肪沉积的影响及机制》

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引物序列见表1。使用核酸检测仪器测定上述RNA浓度及A260与A280比值，A260/A280在1.8～2.1，说明所提RNA纯度较高，符合逆转录要求。以提取RNA为模板，逆转录合成cDNA，置于-20℃条件保存以供后续试验使用。采用RT-PCR方法测定各基因表达水平，制备反应于冰上开展，以反转录cDNA为模板，在ABI PRISM 7500 SDS RT-PCR system中检测，上机采用20μL体系。cDNA模板稀释倍数为5倍。上下游引物添加量为0.4μmol·L-1。β-actin为参照基因，结果以Ct值显示，使用2-△△法计算基因相对表达量。