《表1 文库构建及鉴定引物》

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《猪圆环病毒2型特异性纳米抗体文库的构建及鉴定》

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根据Maass和Harmsen等[9-10，16]文献报道使用的引物并做适当修改，设计两对特异性的引物扩增羊驼重链抗体基因片段。文库构建及鉴定所用引物如表1所示。其中VHH1-F位于抗体编码区的前导序列保守区，VHH1-R位于抗体CH2结构域高度保守区，该对引物用于扩增大小分别为900 bp的vh-CH1-CH2片段和约700 bp的vhh-CH2片段；VHH2-F和VHH2-R用于从700 bp的vhhCH2片段中扩增得到约400 bp的羊驼重链抗体重链可变区vhh片段，两对引物分别在抗体结构中的位置如图1所示。VHH-Detc-F、VHH-Detc-R为pCANTAB 5E载体上的通用引物，用于文库质量的PCR鉴定。引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成。