《表1 qRT-PCR引物序列》

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《重组人白介素1受体拮抗剂对肝细胞的保护作用》

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将Hep G2接种于6孔板中（1×106/孔），过夜培养；按照正常对照组（PBS对照）、D-Gal N组（4 mg/mL）、rh IL-1Ra处理组（D-Gal N 4 mg/m L，rh IL-1Ra 50μg/mL）加药后继续培养48 h；收集细胞，用冷PBS洗涤，提取各组细胞的总RNA，并对总RNA的浓度进行测定和质量检测；用TAKARA的反转录试剂盒合成c DNA；根据Fast Start Universal SYBR Green Master试剂盒要求，用ABI荧光定量PCR仪进行q RT-PCR，检测每组细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA水平，引物序列见表1；每组3个复孔，以β-actin为内参[10-11]，PCR结果采用△△Ct法计算mRNA相对表达水平。