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目录1

第一章 概论1

一、酶法分析原理1

二、酶的性质2

三、影响酶反应速度诸因素4

1．酶浓度的影响5

2．底物浓度的影响5

3．激活剂的影响6

4．抑制剂的影响7

（1）可逆抑制8

（2）不可逆抑制9

5．温度的影响11

6．pH的影响11

7．离子强度的影响13

四、浓度测定13

1．总变化法或平衡法14

2．动力学法15

五、生化试剂处理16

六、酶活性17

参考文献18

一、化学方法20

二、仪器方法20

第二章 测定方法20

1．测压法21

2．分光光度法21

3．旋光测定法24

4．电化学法25

（1）离子选择性电极25

（2）微电流电位法26

（3）电流法26

（4）电量法28

（5）极谱法28

5．荧光法29

6．放射化学法31

参考文献32

第三章 酶的测定35

一、概述35

二、水解酶35

1．淀粉酶35

2．胆碱酯酶36

（1）测压法与pH法36

（2）比色法37

（3）电化学法38

（4）荧光法39

（5）放射测量法45

3．纤维素酶45

5．二氧化碳 （147

4．胰凝乳蛋白酶47

5．β－葡糖苷酶与半乳糖苷酶49

6．β－葡糖醛酸苷酶51

7．透明质酸酶51

8．脂肪酶53

9．磷酸酯酶58

10．尿素酶62

1．氨基酸氧化酶63

三、氧化酶63

2．过氧化氢酶65

3．葡糖氧化酶68

4．过氧化物酶72

5．黄嘌呤氧化酶73

四、脱氢酶76

1．概述76

2．乳酸脱氢酶80

3．6－磷酸葡糖脱氢酶81

4．谷氨酸脱氢酶81

5．α－羟基丁酸脱氢酶82

7．苹果酸脱氢酶83

6．醇脱氢酶和甘油脱氢酶83

五、激酶与转氨酶84

六、其它酶87

参考文献87

第四章 底物的测定99

一、概述99

二、糖类99

1．葡萄糖99

（1）用己糖激酶测定99

（2）用葡糖氧化酶测定100

（i）测量耗氧量101

（ii）用过氧化物酶测定102

（iii）其它方法103

（3）用其它酶测定104

2．半乳糖104

3．果糖106

4．蔗糖107

5．糖原108

6．其它糖类109

三、胺类111

1．用二胺氧化酶测定111

2．用单胺氧化酶测定112

3．用尿素酶测定尿素113

四、氨基酸115

1．用D－氨基酸氧化酶测定D－氨基酸115

2．用L－氨基酸氧化酶测定L－氨基酸116

3．用L－氨基酸脱羧酶测定L－氨基酸119

4．L－谷氨酸的测定121

（1）用谷氨酸脱氢酶测定121

5．L－丙氨酸的测定122

（2）用谷氨酸－丙酮酸转氨酶测定122

6．L－门冬氨酸的测定123

7．肌酸的测定123

五、有机酸124

1．乙酸124

2．丁酸及其羟基衍生物125

3．DL－柠檬酸与D－异柠檬酸126

4．甲酸131

5．延胡索酸133

6．透明质酸133

7．L－乳酸134

（1）用Ⅱ型乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ(NAD)测定134

8．L－苹果酸135

（2）用酵母乳酸脱氢酶（Ⅳ型）测定135

9．琥珀酸136

六、羟基化合物、酯类及醛类137

1．乙醇与脂肪族醇137

（1）用醇脱氢酶测定137

（2）用醇氧化酶测定137

2．甘油与二羟基丙酮138

（1）用甘油脱氢酶测定138

（2）用甘油激酶测定甘油140

3．羟基丙酮酸140

4．丁二醇141

5．山梨糖醇141

8．黄嘌呤与次黄嘌呤142

7．苯酚类142

6．甘油三酸酯142

9．类固醇144

（1）3α－羟基类固醇脱氢酶144

（2）3β-,17β－羟基类固醇脱氢酶144

（3）11β－羟基类固醇脱氢酶144

（4）20β－羟基类固醇脱氢酶144

10．酯类的检定与测定145

七、无机物质146

1．过氧化物146

2．氨146

3．硝酸盐147

4．羟胺147

7．焦磷酸盐148

6．磷酸盐148

参考文献149

第五章 激活剂与辅酶的测定158

一、概述158

二、无机物质的测定158

1．镁、锰及锌的测定158

2．钡的测定161

3．氧的测定162

4．氰化物、硫化物及碘化物的测定163

5．其它物质的测定163

2．黄素单核苷酸165

3．黄素腺嘌呤二核苷酸165

1．概述165

三、辅酶的测定165

4．辅酶Ⅰ*(NAD)与还原型辅酶Ⅰ(NADH)167

5．辅酶Ⅱ*(NADP)与还原型辅酶Ⅱ(NADPH)168

6．用酶促循环法测定辅酶Ⅰ(NAD)与辅酶Ⅱ(NADP)169

7．5′－三磷酸腺苷（ATP）171

（1）用荧光素酶测定171

（2）用己糖激酶与6－磷酸葡糖脱氢酶测定172

（3）用磷酸甘油酸激酶测定172

8．5′－二磷酸腺苷（ADP）与5′－单磷酸腺苷（AMP）173

9．磷酸肌酸174

（1）用己糖激酶测定174

（2）用荧光素酶测定174

参考文献175

一、概述178

第六章 抑制剂的测定178

二、无机物质的测定180

1．概述180

2．葡糖氧化酶182

3．葡糖苷酶182

4．透明质酸酶184

5．转化酶185

6．异柠檬酸脱氢酶186

7．肝酯酶188

8．过氧化物酶189

9．碱性磷酸酯酶192

10．尿素酶193

11．黄嘌呤氧化酶194

12．其它酶系195

三、杀虫剂的测定195

1．抗胆碱酯酶化合物（有机磷化合物与氨基甲酸酯化合物）的测定195

2．根据碳酸酐酶的抑制测定DDT201

3．根据脂肪酶的抑制，测定含氯杀虫剂与其它杀虫剂202

4．用磷酸酯酶测定杀虫剂205

四、其它有机化合物的测定206

1．与巯基结合的化合物206

2．肝素206

3．抗坏血酸207

4．中性去污剂——三通X-100207

5．其它化合物207

参考文献208

一、概述213

第七章 固相酶213

二、淀粉凝胶固相法214

1．概述214

2．固相胆碱酯酶的制备214

3．凝胶固相酶的性质与应用215

4．抑制剂的自动检测217

（1）电化学法217

（2）荧光法219

三、聚丙烯酰胺凝胶固相法221

1．概述221

2．凝胶的制备（Hicks和Updike法）221

3．凝胶的性质222

4．尿素电极的制备226

5．其它的研究227

四、酶的其它固相法228

1．概述228

2．与高聚物骨架（PolymericLattices）的共价键结合229

（1）不溶性的胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶229

（2）不溶性的木瓜蛋白酶230

五、未来的应用231

参考文献232

第八章 自动化在酶法分析中的应用235

一、概述235

二、起始斜率法236

三、固定浓度（变化时间）法237

四、固定时间法240

参考文献254

附录各种酶的分析测定综合一览表256