《酶法分析手册》求取 ⇩

第一章总论1

一、酶法分析原理1

（一）酶是催化剂1

（二）酶的专一性2

（三）酶作为分析试剂2

（四）酶的分类3

（五）酶活性的定义5

（六）同工酶7

二、酶促反应的特性8

（一）引言8

（二）非酶催化反应的动力学8

（三）均相反应体系的酶反应动力学9

（四）预保温与滞后期14

三、影响酶促反应的因素15

（一）底物浓度的影响15

（二）酶浓度的影响16

（三）激活剂的影响17

（四）抑制剂的影响18

（五）温度的影响21

（六）pH的影响23

（七）离子强度的影响24

四、酶法分析的意义25

（一）作为临床化学的诊断方法25

（二）用于食品加工与发酵30

（三）其它方面31

五、酶法分析的实验技术31

（一）酶促反应中相关物质的浓度测定31

（二）酶促反应测定方法34

（三）生化试剂的处理43

一般参考资料45

参考文献46

第二章酶的测定51

一、概述51

二、醇脱氢酶51

（一）概况51

（二）测定方法53

三、醛缩酶53

（一）概况53

（二）测定方法54

四、D－氨基酸氧化酶55

（一）概况55

（二）测定方法56

五、L－氨基酸氧化酶58

（一）一般性质58

（二）测定方法59

六、α－淀粉酶59

（一）一般性质59

（二）测定方法61

七、L－精氨酸酶63

（一）一般性质63

（二）测定方法64

八、芳基硫酸酯酶65

（一）概况65

（二）测定方法66

九、碳酸酐酶66

（一）概况66

（二）测定方法67

十、过氧化氢酶68

（一）概况68

（二）测定方法69

十一、胆碱酯酶71

（一）概况71

（二）测定方法73

十二、α－胰凝乳蛋白酶79

（一）概况79

（二）测定方法80

十三、肌酸激酶82

（一）概况82

（二）测定方法84

十四、脱氧核糖核酸酶Ⅰ87

（一）概况87

（二）测定方法88

十五、二胺氧化酶88

（一）概况88

（二）测定方法89

十六、β－半乳糖苷酶90

（一）概况90

（二）测定方法91

十七、葡糖氧化酶93

（一）概况93

（二）测定方法94

十八、葡糖－6－磷酸脱氢酶97

（一）概况97

（二）测定方法99

十九、磷酸葡糖异构酶99

（一）概况99

（二）测定方法100

二十、β－葡糖苷酶101

（一）概况101

（二）测定方法102

二十一、β－葡糖苷酸酶104

（一）概况104

（二）测定方法105

二十二、谷－草转氨酶106

（一）概况106

（二）测定方法108

二十三、谷－丙转氨酶109

（一）概况109

（二）测定方法111

二十四、γ－谷氨酰转移酶112

（一）概况112

（二）测定方法113

二十五、己糖激酶114

（一）概况114

（二）测定方法116

二十六、α－羟丁酸脱氢酶116

（一）概况116

（二）测定方法117

二十七、异柠檬酸脱氢酶118

（一）概况118

（二）测定方法120

二十八、乳酸脱氢酶121

（一）概况121

（二）测定方法124

二十九、亮氨酸氨肽酶127

（一）概况127

（二）测定方法129

三十、脂酶129

（一）概况129

（二）测定方法131

三十一、单胺氧化酶134

（一）概况134

（二）测定方法135

三十二、胃蛋白酶136

（一）概况136

（二）测定方法137

三十三、过氧物酶138

（一）概况138

（二）测定方法139

三十四、酸性磷酸酯酶141

（一）概况141

（二）测定方法142

三十五、碱性磷酸酯酶143

（一）概况143

（二）测定方法144

三十六、丙酮酸激酶148

（一）概况148

（二）测定方法150

三十七、山梨糖醇脱氢酶150

（一）概况150

（二）测定方法152

三十八、胰蛋白酶153

（一）概况153

（二）测定方法154

三十九、脲酶155

（一）概况155

（二）测定方法156

四十、黄嘌呤氧化酶157

（一）概况157

（二）测定方法159

参考文献160

第三章底物的测定179

一、引言179

二、乙醛180

（一）概况180

（二）以醇脱氢酶为试剂180

（三）以醛脱氢酶为试剂181

三、乙酸和乙酰磷酸182

（一）概况182

（二）以乙酸激酶作为乙酸或乙酰磷酸的检测试剂182

（三）乙酸激酶和羟胺183

（四）乙酸的其它检测方法184

四、乙酰乙酸和D-3－羟基丁酸185

（一）概况185

（二）用D-3－羟基丁酸脱氢酶检测186

五、乙酰胆碱和胆碱188

（一）概况188

（二）以胆碱激酶为试剂188

（三）用乙酰CoA合成酶检测190

（四）用醇脱氢酶检测乙酰胆碱190

六、L－和D－丙氨酸191

（一）概况191

（二）用丙氨酸脱氢酶检测L－丙氨酸191

（三）用GPT和LDH检测L－丙氨酸192

（四）用D－氨基酸氧化酶和LDH检测D－丙氨酸192

（五）D－丙氨酸的其它检测方法193

七、胺——一般胺和组胺、精胺、精脒193

（一）概况193

（二）二胺氧化酶的应用193

（三）单胺氧化酶的应用194

（四）用单胺氧化酶（MAO）检测精胺和精脒195

（五）用粘质赛氏杆菌来源的精胺氧化酶检测精脒196

八、D－和L－氨基酸197

（一）概况197

（二）D－氨基酸（D－丙氨酸、D－甲硫氨酸、198

D－苯丙氨酸、D－脯氨酸、D－色氨酸、D－酪氨酸和D－亮氨酸）198

（三）用L－氨基酸氧化酶测定L－氨基酸：L－精氨酸、L－亮氨酸、L－甲硫氨酸、L－苯丙氨酸、L－脯氨酸、L－色氨酸和L－酪氨酸199

（四）用L－氨基酸脱羧酶测定L－氨基酸：L－赖氨酸、L－酪氨酸、L－精氨酸、L－组氨酸、L－鸟氨酸、L－天冬氨酸和L－谷氨酸201

（五）用酪氨酸酶检测L－酪氨酸204

九、氨204

（一）概况204

（二）分析方法205

十、L－天冬氨酸和L－天冬酰胺206

（一）概况206

（二）检测方法206

十一、丁酸、2－羟基丁酸和γ－氨基丁酸（GABA）207

（一）概况207

（二）检测方法207

十二、二氧化碳210

（一）概况210

（二）检测方法211

十三、肉毒碱和乙酰肉毒碱212

（一）概况212

（二）用肉毒碱乙酰基转移酶检测肉毒碱212

（三）乙酰肉毒碱的检测213

十四、纤维素213

（一）概况213

（二）检测方法214

十五、胆甾醇215

（一）概况215

（二）检测方法215

十六、柠檬酸与异柠檬酸217

（一）概况217

（二）检测方法217

十七、肌酸、肌酸酐和肌酸磷酸220

（一）概况220

（二）肌酸酐检测方法221

（三）肌酸检测方法222

（四）肌酸磷酸（CP）检测方法223

十八、二羟丙酮和二羟丙酮磷酸224

（一）概况224

（二）二羟丙酮（DHA）检测方法224

（三）二羟丙酮磷酸（DAP）检测方法225

十九、乙醇、甲醇、烯丙醇、丙醇和225

丁醇225

（一）概况225

（二）检测方法226

二十、甲酸和四氢叶酸229

（一）概况229

（二）检测方法229

二十一、果糖、果糖－1－磷酸和果糖－1，6－二磷酸231

（一）概况231

（二）用己糖激酶检测D－果糖231

（三）用果糖激酶检测D－果糖232

（四）糖类混合物的检测（包括D－果糖、D－乳糖、D－麦芽糖、D－葡萄糖、D－糖元及D－水杨苷）（五）果糖－1－磷酸和D－果糖－1,6－二磷酸（F-1,6-P）的检测234

二十二、反丁烯二酸和苹果酸236

（一）概况236

（二）用苹果酸脱氢酶237

（MDH）检测苹果酸237

（三）用苹果酸脱氢酶238

（MDH）和谷－草转氨酶（GOT）测定苹果酸238

（四）用苹果酸脱氢酶238

（MDH）、柠檬酸合成酶（CS）和磷酸转乙酰基酶（PTA）测定苹果酸238

（五）反丁烯二酸和含有苹果酸的混合物的检测239

二十三、D－半乳糖、α-D－半乳糖－1－磷酸和D－半乳糖－6－磷酸239

（一）概况239

（二）用半乳糖氧化酶检测半乳糖240

（三）用半乳糖脱氢酶检测D－半乳糖242

（四）通过水解为D－半乳糖检测α-D－半乳糖－1－磷酸和D－半乳糖－6－磷酸243

（五）用尿苷酰转移酶检测半乳糖－1－磷酸243

二十四、β-D－葡萄糖244

（一）概况244

（二）检测方法246

二十五、葡糖－1－磷酸、葡糖－6－磷酸和果糖－6－磷酸255

（一）概况255

（二）葡糖－1－磷酸的检测255

（三）葡糖－6－磷酸和果糖－6－磷酸的检测256

二十六、D－葡糖酸和D－葡糖酸－6－磷酸256

（一）概况256

（二）D－葡糖酸和D－葡糖酸－6－磷酸的检测256

二十七、D－葡糖胺和D－葡糖胺－6－磷酸257

（一）概况257

（二）D－葡糖胺的检测257

（三）D－葡糖胺－6－磷酸的检测258

二十八、L－谷氨酸和L－谷氨酰胺259

（一）概况259

（二）L－谷氨酸的检测259

（三）L－谷氨酰胺的检测261

二十九、甘油和甘油三酯263

（一）概况263

（二）甘油和二羟丙酮的检测264

（三）用GK、PK和LDH检测甘油三酯与甘油265

三十、D-甘油酸267

（一）概况267

（二）检测方法268

三十一、糖元269

（一）概况269

（二）检测方法269

三十二、乙醛酸（二羟乙酸）271

（一）概况271

（二）检测方法271

三十三、透明质酸272

（一）概况272

（二）检测方法272

三十四、肌醇和肌醇－1－磷酸273

（一）概况273

（二）检测方法273

三十五、D－和L－乳酸275

（一）概况275

（二）用D-LDH检测D－乳酸275

（三）用L-LDH检测L－乳酸276

（四）用LDH和谷－丙转氨酶（GPT）检测L－乳酸（五）用酵母酶（Ⅳ型）测定L－乳酸278

三十六、乳糖279

（一）概况279

（二）检测方法279

三十七、卵磷脂（胆碱磷酸甘油三酯）281

（一）概况281

（二）检测方法281

三十八、顺丁烯二酸282

（一）概况282

（二）检测方法282

三十九、麦芽糖283

（一）概况283

（二）检测方法283

四十、D－甘露糖、D－甘露糖－1－磷酸和D－甘露糖－6－磷酸284

（一）概况284

（二）检测方法284

四十一、硝酸和亚硝酸286

（一）概况286

（二）用硝酸还原酶检测硝酸288

（三）用亚硝酸还原酶检测亚硝酸288

四十二、草酸289

（一）概况289

（二）检测方法289

四十三、草酰乙酸和α－酮戊二酸290

（一）概况290

（二）草酰乙酸的检测290

（三）α－酮戊二酸的检测291

四十四、过氧化物291

（一）概况291

（二）检测方法292

四十五、L－苯丙氨酸293

（一）概况293

（二）检测方法294

四十六、磷酸和焦磷酸295

（一）概况295

（二）磷酸的检测295

（三）焦磷酸的检测297

四十七、丙酮酸、羟基丙酮酸、磷酸烯醇丙酮酸和D-2－磷酸甘油酸298

（一）概况298

（二）丙酮酸、磷酸烯醇丙酮酸和2－磷酸甘油酸的检测299

（三）羟基丙酮酸的检测299

四十八、棉籽糖、蜜二糖和蔗糖300

（一）概况300

（二）棉籽糖的检测300

（三）蔗糖的检测301

（四）蜜二糖的检测302

四十九、D－山梨糖醇、L－艾杜糖醇和D－山梨糖醇－6－磷酸302

（一）概况302

（二）检测方法303

五十、甾类化合物304

（一）概况304

（二）检测方法305

五十一、脲309

（一）概况309

（二）检测方法309

五十二、尿酸312

（一）概况312

（二）检测方法312

五十三、黄嘌呤和次黄嘌呤314

（一）概况314

（二）检测方法315

五十四、木糖醇316

（一）概况316

（二）检测方法316

五十五、其它测定317

参考文献325

第四章嘌呤、核苷酸、辅酶、激活剂和抑制剂的检测351

一、概述351

二、嘌呤、核苷酸和辅酶的检测353

（一）引言353

（二）腺嘌呤和鸟嘌呤357

（三）腺苷359

（四）腺苷－5′－二磷酸（ADP）和腺苷－5′－一磷酸（AMP）359

（五）腺苷－5′－三磷酸（ATP）361

（六）腺苷－5′－二磷酸葡糖（ADP－葡萄糖）363

（七）胞苷和胞嘧啶363

（八）胞苷－5′－一磷酸（C－5-MP）、胞苷－5′－二磷酸（CDP）和胞苷－5′－三磷酸（CTP）（九）辅酶A（CoA）及其衍生物366

（十）黄素辅酶－黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）369

（十一）鸟苷及其衍生物371

（十二）肌苷及其衍生物372

（十三）尼克酰胺辅酶的检测374

（十四）尼克酰胺单核苷酸（NMN）378

（十五）核酸（RNA和DNA）379

（十六）吡哆醛－5－磷酸和吡哆胺－5－磷酸379

（十七）尿苷磷酸及其二磷酸葡糖380

三、辅助因子的再循环381

四、根据对酶系统的激活作用测定无机物质382

（一）引言382

（二）钡的测定384

（三）Ca2+和K+的测定384

（四）镁和锰的测定385

（五）Zn2+、Cu2+、Co2+和Ni2+的测定386

（六）氧的测定388

（七）氰化物、硫化物和碘化物的测定388

五、根据对酶反应的抑制作用检测有机物质388

（一）杀虫剂（有机磷化合物、氯化物以及氨基甲酸酯化合物）的检测388

（二）肝素的检测397

（三）抗坏血酸的检测398

（四）和SH基结合的化合物的检测398

（五）中性去污剂TritonX-100的检测398

（六）其它化合物398

六、根据对酶系统的抑制作用检测无机物质399

（一）引言399

（二）醇脱氢酶400

（三）碱性磷酸酯酶400

（四）葡糖氧化酶403

（五）β－葡糖苷酶403

（六）透明质酸酶404

（七）转化酶404

（八）异柠檬酸脱氢酶405

（九）肝酯酶406

（十）过氧物酶406

（十一）脲酶408

（十二）黄嘌呤氧化酶408

参考文献409

第五章固定化酶及其在酶法分析中的应用418

一、概述418

二、固定化技术419

（一）微型胶囊法419

（二）吸附420

（三）通过双功能试剂进行共价交联420

（四）胶格包埋421

（五）和水不溶性载体共价结合421

三、固定化酶的性质424

四、固定化酶的实验制备例426

（一）聚丙烯酰胺包埋酶的制备426

（二）共价偶联酶的制备426

五、酶电极430

（一）引言430

（二）酶电极的制作432

（三）电极的工作特性438

（四）各种电极的比较458

六、分析工作中应用的固定化酶柱470

（一）引言470

（二）电化学方法470

（三）分光光度法472

（四）热交换测定474

七、固体表面荧光法476

（一）引言476

（二）实验477

（三）方法479

（四）硅橡胶衬垫法的优点481

（五）用固定化酶检测某些重要底物482

八、用于检测抑制剂的固定化酶系统486

九、固定化酶搅拌器488

参考文献489

第六章酶法自动化分析499

一、总则499

二、自动化分析的原理501

（一）引言501

（二）动力学方法501

（三）各分析步骤的自动化506

三、临床自动化仪器507

（一）引言507

（二）阿布特（Abbott）ABA-50型与-100型双波长分析仪507

（三）美制1040型化学检测程序分析装置515

（四）离心式分析仪518

（五）鲍希（Bausch）与罗姆(Lomb)400—型分光光度检测系统522

（六）脲氮与葡萄糖分析仪523

（七）贝克曼（Beckman）系统TR型酶活性分析仪525

（八）酶化学分析仪527

（九）杜帮（Dupont）自动临床分析仪528

（十）伊配道夫－布雷克曼(Eppendorf-Brink-man)KEA-5080型与EPA-5091型分析仪529

（十一）吉尔福特（Gilford）3500型分析仪系（十二）海塞尔（Hycel）HMA1600型自动化仪531

（十三）LKB超级分析系统（UltralabSystem）531

（十四）潘金－爱尔迈（Per-kinElmer）柯尔曼（Coleman）淀粉酶－脂酶分析仪535

（十五）潘金－爱尔迈KA-150与C4B型自动分析仪（十六）泰赫尼柯（Techni-con）仪器539

（十七）托马氏（Thomas）小型化分析仪546

（十八）维塔隆－阿克斯（Vitatron-Akes）分析仪547

四、自动化仪的应用549

参考文献559

附录592

各种酶分析测定综合一览表592