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目 录1

第一章固相酶（1970年前国外资料综述）1

一、固相酶的制备方法3

（一）吸附法3

（二）载体偶联法（共价法）6

（三）交联法 （19

（四）包埋法21

（五）其他24

二、固相酶的性质27

（一）“相对活力”和专一性的改变28

（二）pH－活力曲线和最适pH34

（三）米氏常数的改变39

（四）稳定性的增加42

（五）抑制剂的影响46

（六）其他性质47

三、固相酶的应用47

（一）工业生产中的应用47

（二）分析化学中的应用53

（三）酶反应机制的阐明58

二、配基的选择 （159

（二）纯化酶抑制剂的吸附剂 （162

（四）医药中的应用62

（四）利用分子内相互作用的吸附剂 （163

（五）酶和抑制剂的分离提纯——亲和层析65

（六）免疫化学中的应用71

四、结束语72

第二章固相酶研究的新进展75

（二）共价（载体偶联）法75

一、固相化方法75

（一）吸附法75

（三）交联法81

（四）包埋法81

（五）一些新方法82

二、固相酶的性质85

（一）固相酶活力的变化85

（二）最适pH和稳定性87

（三）固相酶反应器的动力学研究88

（一）工业中的酶反应器89

三、固相酶的应用研究89

（二）分析中的应用91

（三）理论研究中的应用92

（四）医药中的应用研究97

（五）生物学高分子纯化中的应用97

四、小结97

固相酶总表99

参考资料129

第三章亲和层析145

一、载体的选择149

（一）纤维素和葡聚糖凝胶150

（二）交联共聚和物理包埋154

（三）琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶和多孔玻璃155

（一）纯化酶的吸附剂159

（三）纯化亲和标记肽的吸附剂163

（七）纯化抗原和抗体的吸附剂164

（六）纯化激素的吸附剂164

（五）纯化传递蛋白和受体的吸附剂164

（八）纯化核酸的吸附剂165

三、琼脂糖及聚丙烯酰胺的衍生物的制备165

（一）琼脂糖的活化及其衍生物的制备165

（二）聚丙烯酰胺衍生物的制备172

四、提高吸附剂亲和力的一些手段172

（一）引入“手臂”172

（二）增加配基的取代程度176

（三）以最少的键连接176

（四）载体多孔性的影响177

五、亲和吸附和洗脱179

（一）吸附179

（二）洗涤181

（三）酶的洗脱181

（四）亲和柱的再生183

六、亲和层析的应用184

（一）酶的纯化184

（二）分辨化学改变的酶及酶学研究中的其他应用197

（四）纯化互补的和人工合成的肽199

（三）纯化亲和标记的活性中心肽段199

（五）纯化酶的天然抑制剂200

（六）纯化传递蛋白和结合蛋白202

（七）纯化激素203

（八）纯化激素受体及细胞膜制剂204

（九）核酸研究中的应用206

（十）纯化抗体和抗原207

（十一）纯化细胞、细胞器及其他重要高分子211

酶的亲和层析总表212

参考资料229