《PCR检验技术》

第一章 PCR技术概述1

第一节 PCR技术的发明1

第二节 PCR的基本原理2

第三节 PCR技术的特点4

第四节 PCR技术的新进展5

第二章 FCR样品的制备13

第一节 从全血细胞中快速提取DNA13

第二节 从血清中快速提取DNA14

第三节 从痰标本中提取DNA15

第四节 从尿标本中提取DNA16

第五节 从粪便标本中提取DNA17

第六节 从体液标本中提取DNA17

第七节 从临床拭子标本中提取DNA18

第八节 从组织标本中提取DNA19

第九节 从绒毛、羊水标本中提取DNA20

第十节 从细菌培养物中提取DNA21

第十一节 从法医学标本中提取DNA22

第十二节 固相吸附法快速制备DNA和RNA（Boom法）23

第十三节 从临床标本中快速提取RNA24

第十四节 去除临床标本中血污染的方法25

第十五节 DNA、RNA的浓度和纯度测定26

第十六节 DNA、RNA的保存26

第三章 PCR扩增操作方法28

第一节 PCR扩增体系的组成28

第二节 PCR扩增DNA操作方法30

第三节 PCR扩增cDNA操作方法32

第四节 PCR反应条件的选择及优化34

第四章 PCR扩增产物的检测分析36

第一节 琼脂糖凝胶电泳法36

第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳法39

第三节 限制性内切酶分析法41

第四节 核酸探针杂交鉴定法42

第五节 单链构型多态性分析法45

第六节 酶免疫分析法47

第七节 PCR出现问题的分析和解决办法51

第五章 PCR检测常见传染病53

第一节 PCR检测结核杆菌53

第二节 PCR检测淋球菌56

第三节 PCR检测检测霍乱弧菌59

第四节 PCR检测脑膜炎球菌61

第五节 PCR检测幽门螺杆菌62

第六节 PCR检测嗜肺军团菌65

第七节 PCR检测沙门氏杆菌68

第八节 PCR检测白色念珠菌70

第九节 PCR检测甲型肝炎病毒73

第十节 PCR检测乙型肝炎病毒75

第十一节 PCR检测丙型肝炎病毒81

第十二节 PCR检测戊型肝炎病毒83

第十三节 PCR检测狂犬病毒85

第十四节 PCR检测巨细胞病毒87

第十五节 PCR检测单纯疱疹病毒89

第十六节 PCR检测人乳头瘤病毒91

第十七节 PCR检测EB病毒94

第十八节 PCR检测人类免疫缺陷病毒96

第十九节 PCR检测腺病毒100

第二十节 PCR检测乙脑病毒103

第二十一节 PCR检测流行性出血热病毒105

第二十二节 PCR检测沙眼衣原体108

第二十三节 PCR检测肺炎支原体110

第二十四节 PCR检测解脲脲原体112

第二十五节 PCR检测梅毒螺旋体113

第二十六节 PCR检测莱姆病螺旋体116

第二十七节 PCR检测钩端螺旋体119

第六章 PCR检测常见寄生虫病123

第一节 PCR检测恶性疟原虫123

第二节 PCR检测间日疟原虫125

第三节 PCR检测弓形虫126

第四节 PCR检测卡氏肺孢子虫129

第五节 PCR检测克氏锥虫131

第六节 PCR检测利什曼原虫134

第七节 PCR检测隐孢子虫136

第八节 PCR检测旋毛形线虫138

第九节 PCR检测阿米巴原虫140

第十节 PCR检测肠内贾第虫143

第七章 PCR检测常见肿瘤的基因标志157

第一节 PCR检测常见肿瘤时ras癌基因突变157

第二节 PCR检测胰腺癌161

第三节 PCR检测常见肿瘤时P53基因突变163

第四节 PCR检测乳腺癌在腋下淋巴结中的微转移167

第五节 PCR检测常见肿瘤时APC基因突变170

第六节 PCR检测常见肿瘤时C-erb B2基因扩增172

第七节 PCR检测常见肿瘤时DNA聚合酶β基因突变174

第八节 PCR检测急性髓性白血病时AML1-ETO融合基因176

第九节 PCR检测白血病时bcr/ab1融合基因mRNA180

第十节 PCR检测急性早幼粒细胞白血病时RARa/MYL和MYL/RARa二种融合基因mRNA182

第十一节 PCR检测淋巴瘤时t（14;18）染色体异位186

第十二节 PCR检测外套细胞淋巴瘤时t（11;14）染色体异位187

第十三节 PCR检测B淋巴细胞恶性肿瘤时免疫球蛋白重链基因重排189

第十四节 PCR检测急性淋巴细胞白血病时T细胞受体基因重排190

第十五节 PCR检测急性淋巴细胞白血病时E2A/PBX1融合mRNA193

第十六节 PCR检测pre-pre-B-ALL时HRX-FEL融合转录本195

第十七节 PCR检测t（17;19）（q22;p13）ALL时E2A/HLF融合基因197

第十八节 PCR检测白血病患者体内的多药耐药基因表达200

第八章 PCR检测遗传病205

第一节 PCR检测地中海贫血205

第二节 PCR检测血友病209

第三节 PCR检测苯丙酮尿症212

第四节 PCR检测杜氏／贝氏进行性肌营养不良症215

第五节 PCR检测视网膜色素变性218

第六节 PCR检测先天性肾上腺皮质增生症220

第七节 PCR检测Leber's遗传性视神经病221

第八节 PCR检测脆性-X综合症223

第九节 PCR检测性别和性别发育异常226

第十节 PCR检测亨廷顿氏病229

第十一节 PCR检测G-6-PD缺陷231

第十二节 PCR检测镰状细胞性贫血233

第十三节 PCR-SSCP检测家族性多发性结肠息肉235

第九章 PCR在法医学中的应用240

第一节 PCR构建DNA指纹图谱技术240

第二节 PCR在法庭物证鉴定中的应用242

第三节 PCR在亲权鉴定中的应用246

第十章 PCR在动植物检疫中的应用250

第一节 PCR检测口蹄疫病毒250

第二节 PCR检测非洲马瘟病毒252

第三节 PCR检测猪瘟病毒253

第四节 PCR检测猪繁殖和呼吸综合征病毒254

第五节 PCR检测猪丹毒杆菌256

第六节 PCR检测牛白血病病毒257

第七节 PCR检测犬细小病毒258

第八节 PCR检测蓝舌病病毒259

第九节 PCR检测鸡传染性法氏囊病病毒261

第十节 PCR检测牛病毒性腹泻病毒262

第十一节 PCR检测伪狂犬病病毒264

第十二节 PCR检测甘薯羽状斑驳病毒265

第十三节 PCR检测番木瓜环斑病毒266

第十四节 PCR检测黄瓜花叶病毒268

第十五节 PCR检测甜菜黄化病毒270

第十六节 PCR检测芜菁花叶病毒271

第十七节 PCR检测辣椒轻微斑驳病毒272

第十八节 单温扩增检测柑桔衰退病毒274

第十九节 PCR/T检测菜豆黄色花叶病毒277

附录一 分子生物学常用试剂和数据279

一、常用DNA分子量标准参照物279

二、几种生物的单倍体DNA含量279

三、几种代表性限制性内切酶的细菌来源和靶顺序279

四、常用蛋白酶抑制剂的特性280

五、常用酶溶液的配制281

六、用于λ噬菌体操作的溶液282

七、常用缓冲液282

八、同位素资料286

九、凝胶加样缓冲液287

十、常用的电泳缓冲液288

十一、溴化乙锭溶液的净化处理288

十二、PCR常用试剂的配制方法289

十三、细菌培养基292

十四、用于PCR的耐热DNA聚合酶特性294

十五、常见抑制剂对TaqDNA聚合酶活性的影响294

附录二 常见的市售酸碱的浓度295

附录三 各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值295

附录四 医学检验常用试剂配制295

附录五 国内外化学试剂的规格、等级与标志303

附录六 常用化学药品的英文、分子式和分子量305

附录七 原子量313

附录八 国际制与统一公制计量单位对照316

附录九 希腊字母表317

附录十 离心转速与相对离心力（g）的换算317

附录十一 几种常用指示剂变色点、变色范围及配制318

附录十二 1ml水在不同温度时的重量对照表318

附录十三 在标准温度20℃时标称容量的允许误差318

附录十四 蛋白质含量测定319

附录十五 分子生物学常用名词解释321

附录十六 PCR常用缩写词汇注释324

附录十七 医学检验中常用词汇英汉对照和缩写325

附录十八 国内外常用PCR扩增仪337

附录十九 国内检验试剂、仪器公司（厂）名录338