《表1 定量引物序列:基于基因芯片整合分析筛选及验证BeWo细胞合体化相关调控因子》

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《基于基因芯片整合分析筛选及验证BeWo细胞合体化相关调控因子》


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将收集到的细胞液氮预冷后存储于-80℃超低温冰箱中。待样本齐备后,用Trizol (Invitrogen)裂解法抽提RNA;提取出的RNA经无RNAase的DNaseⅠ处理去除样本中潜在的DNA污染。经Takara公司逆转录转录试剂盒得到c DNA后,用SYBR Green Supermix (BioRad)试剂进行靶标基因定量检测,GAPDH或Actin 3作为内参标记。所有定量引物(表1)均用Primer5.0软件进行设计,并由华大基因合成并纯化。基因相对表达水平使用2-ΔΔCt方法进行计算,并使用SPSS 18.0进行统计分析[17]。检验水准α=0.05。