《表2 特异性qRT-PCR检测引物》
注:BCL2、BMP4、WWOX、DDR2、FGF12、EPHB3、NRG1和SHOX2是目的基因,β-ACTIN是管家基因,管家基因是指生物体中各个器官组织中能够持续稳定表达的基因。
取大鼠胚胎11.5 d心脏组织,用TRIZOL裂解细胞,采用氯仿、异戊醇萃取RNA,随后用75%乙醇洗去杂质,再用RNA-Free water溶解。按照TransScript誖One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)说明书的详细步骤,将mRNA反转录成cDNA文库。以得到的cDNA文库作为模板,按照TransStart Tip Green qPCR SuperMix(TaKaRa说明书配制反应体系 (表1),在Quanstudio 5(Thermo Fisher)仪器上按照标准的两步法运行Q-PCR。将正常样本用Ct值均一化(以β-ACTIN作为管家基因进行校正)后,按照2-△△Ct法计算基因在攻毒样本中的表达量。文中所用到的引物序列详见表2。
图表编号 | XD0093713700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.31 |
作者 | 岳树盛、史艳、向红群、王珩、朱泽曙、丁浩东、范雄伟、吴秀山、李芳、莫小阳 |
绘制单位 | 湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心、湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心 |
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