《表2 特异性qRT-PCR检测引物》

《表2 特异性qRT-PCR检测引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《流感病毒影响大鼠胚胎心脏发育机制的初步探究》


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注:BCL2、BMP4、WWOX、DDR2、FGF12、EPHB3、NRG1和SHOX2是目的基因,β-ACTIN是管家基因,管家基因是指生物体中各个器官组织中能够持续稳定表达的基因。

取大鼠胚胎11.5 d心脏组织,用TRIZOL裂解细胞,采用氯仿、异戊醇萃取RNA,随后用75%乙醇洗去杂质,再用RNA-Free water溶解。按照TransScript誖One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)说明书的详细步骤,将mRNA反转录成cDNA文库。以得到的cDNA文库作为模板,按照TransStart Tip Green qPCR SuperMix(TaKaRa说明书配制反应体系 (表1),在Quanstudio 5(Thermo Fisher)仪器上按照标准的两步法运行Q-PCR。将正常样本用Ct值均一化(以β-ACTIN作为管家基因进行校正)后,按照2-△△Ct法计算基因在攻毒样本中的表达量。文中所用到的引物序列详见表2。