《表1 qRT-PCR基因特异性引物》

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《南瓜砧木嫁接对低温下西瓜幼苗耐冷性、光合作用及抗逆基因表达的影响》


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从葫芦科基因组数据库(http://cucurbitgenomics.org/search/genome/1)选取9个抗逆相关基因和4个Calvin循环关键基因并使用GenScript在线设计基因特异性引物(https://www.genscript.com/tools/real-time-pcr-tagman-primerdesign-tool)(表1) 。用单峰熔解曲线确认引物的扩增特异性。实时荧光定量PCR的反应体系为10μL,条件为94℃预变性30s;95℃变性5s;55℃退火15s;72℃延伸5s;40个循环。内参基因为ClEF1ɑ、ClACT和ClUBCP[23]。基因表达水平参考2-ΔΔCT法进行计算[24],热图数值以log2对数表示。