《表1 qRT-PCR检测microRNA-18a的引物序列》

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《MicroRNA-18a对乳腺癌细胞MCF-7/PTX紫杉醇耐药性的影响》


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收集各实验组3×105~5×105个细胞,加入1 mL TRIzol,提取细胞总RNA。采用紫外分光光度计检测总RNA浓度及纯度(A260/A280),逆转录后保存产物。Mi?croRNA?18a及内参U6的qRT?PCR引物序列详见表1。定量PCR扩增仪检测细胞内microRNA?18a表达水平。qRT?PCR扩增体系为10μL,反应条件:95℃,30 s;95℃,5 s;60℃,35 s,循环35次。采用2-ΔΔCt计算microRNA?18a相对表达量,重复3次进行统计分析。